PFA固定，即使用4%多聚甲醛（PFA）進行固定，是一種廣泛套用於免疫組化、免疫細胞化學等生物樣品檢測中的固定技術。這種固定液主要由多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水等組成，pH值維持在7.2至7.4之間。它能夠有效保護組織和細胞的形態結構以及核酸，防止組織細胞自溶與腐敗，保持細胞內的各種成分，如蛋白質、脂肪、碳水化合物、酶類等處於接近生活狀態的結構和位置。
操作步驟包括將組織或細胞樣本置於4%PFA溶液中，根據樣本的大小和類型，固定時間通常在15分鐘到數小時之間。固定後，樣本需要用PBS（磷酸鹽緩衝液）或其他適當的緩衝液進行洗滌，以去除多餘的固定劑。此後，樣本可以根據實驗需求進行進一步的處理，如切片、染色、免疫標記等。
需要注意的是，PFA固定液具有一定刺激性和腐蝕性，操作時應在通風良好的環境下進行，並避免吸入。溫度對固定效果有明顯影響，提高溫度可以加速固定作用，但溫度不宜過高。此外，應避免過度延長固定時間，以防止生物大分子過度交聯。固定液的容量應足夠，一般固定液與組織塊的體積比率應大於10:1。若無法及時固定新鮮組織，應保存於生理鹽水中並及時送檢。最後，PFA固定液僅限於科研用途，禁止用於人體。