徒手切片的操作方法主要包括以下步驟：
準備材料。選取新鮮的植物材料，長度約為2至3厘米，削平材料的切面，左手用拇指和食指的第一關節指彎夾住材料，使材料固定不動，拇指略低於食指，以防止刀傷，並使材料上端超出手指2至3毫米。
準備工具。右手握住刀片，刀片要非常鋒利，雙面刀片必須是新用的，刀片沾水，刀口向內，並與材料切面平行。
切割材料。以刀口自外側左前方向內側右後方拉切，使用臂力而不要用腕力及握刀指關節的力量，左手保持不動，動作要敏捷，材料要一次切下，切忌中途停頓或推前拖後作「拉鋸」式切割。
轉移切片。用濕毛筆將切片輕輕移入培養皿的清水中備用，所切的材料和刀片一定要保持水平方向，不要切斜。
觀察與檢查。切下足夠多的切片後，挑選薄而平的切片做成臨時裝片供鏡檢，必要時也可以製成永久裝片。
在整個操作過程中，需要注意保持材料和刀片的濕潤，避免材料失水變形，同時動作要輕柔，以防止材料受損。